Monthly Archive: January 2017

假手术重组人生长激素治疗组(G8O);7天,n=12,共80只 制作阻塞性黄疸大鼠模型。术后rhGH组及GSO组行双后肢内侧轮流皮

假手术重组人生长激素治疗组(G8O);7天,n=12,共80只.制作阻塞性黄疸大鼠模型。术后rhGH组及GSO组行双后肢内侧轮流皮下注射重组人生长激素(0.75iu/kg/d)。术后7天、14天采集大鼠血液、取回肠末端小肠组织。大鼠血液检测肝功能。小肠组织HE染色观察黏膜病理形态学改变,免疫组织化学检测肠黏膜紧密连接蛋白claudin-1及MEK2含量。 ROCK抑制剂 结果:1)rhGH组、OJ组与SO组比较,血TB、DB和ALT值增高(P0.05有统计学意义)、t检验、方差分析(Analysis of variance,ANOVA)和LSD法、因素相关性使用直线相关分析、各临床资料相关性使用X2检验,P

2倍,1 h后几乎恢复到正常水平。 2 JNK特异性抑制剂SP-600125呈剂量依赖性的方式抑制AngⅡ诱导的JNK活化和c-J

2倍,1 h后几乎恢复到正常水平。 2.JNK特异性抑制剂SP-600125呈剂量依赖性的方式抑制AngⅡ诱导的JNK活化和c-Jun磷酸化,当浓度为10μmol/L和20μmol/L时其抑制作用分别达75%和90%,SP-600125对ERK1/2和p38 MAPK磷酸化水平均无抑制作用。 3.AngⅡ刺激后c-Jun转录活性及AP-1 DNA结合活性显著增加,SP-600125可呈剂量依赖的抑制AngⅡ诱导的c-Jun转录活性及AP-1 DNA结合活性的增加,20μmol/L SP-600125预处理几乎完全阻断c-Jun的反式激活。4.AngⅡ显著增加MCP-1启动子活性及MCP-1 mRNA表达,SP-600125可呈剂量依赖性的抑制AngⅡ诱导的MCP-1启动子活化和MCP-1 mRNA表达以及系膜细胞MCP-1、TGF-β和FN的分泌。5.1~20μmol/L SP-600125以剂量依赖的方式抑制AngⅡ促进的系膜细胞~3H-TdR掺入量和细胞计数的增加,而MEK1/2特异性抑制剂PD-98059和p38 MAPK特异性抑制剂SB-203580对AngⅡ诱导的系膜细胞数目的增加无抑制作用。 结论:AngⅡ→JNK/SAPK→c-Jun/AP-1信号通路在系膜细胞增殖和炎症介质分泌中发挥一定的作用。JNK特异性抑制剂SP-600125能部分抑制AngⅡ诱导的系膜细胞增殖和炎症介质分泌。 二、血管紧张素Ⅱ通过ROS/EGFR/JNK/AP-1信号通路诱导肾小球系膜细胞增殖 目的:我们前期的研究发现AngⅡ可通过JNK/AP-1信号通路诱导肾小球系膜细胞增殖,但JNK/AP-1活化的上游通路尚不清楚。本研究探讨活性氧(ROS)和表皮生长因子受体(EGFR)在AngⅡ诱导的JNK/AP-1活化及系膜细胞增殖中的作用并探讨ROS释放的来源。 Metformin 方法:体外培养人肾小球系膜细胞,应用~3H-TdR掺入法和细胞计数测定系膜细胞增殖;荧光探针2,7—二氯二氢荧光素乙酰乙酸(DCFDA)检测细胞内ROS产生;化学发光法检测尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性;实时定量RT-PCR检测NADPH亚基p47phox和p67phox mRNA表达;Western Blot检测p47phox和p67phox膜转位以及EGFR、JNK和c-Jun磷酸化。 Tofacitinib数据表 结果:1、AngⅡ呈时间依赖性和剂量依赖性促进肾小球系膜细胞ROS产生。AngⅡ刺激3 min,系膜细胞内ROS产生明显增加,至60 min达到高峰,系膜细胞ROS产生是对照组2.26倍;1、10、100nmol/L AngⅡ刺激60 min,ROS产生分别是对照组的1.82、2.92和4.08倍。AT1受体(AT1R)拮抗剂losartan完全阻断了AngⅡ诱导的ROS产生,而AT2受体(AT2R)拮抗剂PD123319无抑制作用。2、NADPH氧化酶抑制剂apocynin和DPI几乎完全阻断AngⅡ诱导的ROS产生,而线粒体complexⅠ抑制剂鱼藤酮(rotenone,ROT)、黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇(allopurinol,ALLO)、环氧化酶抑制剂吲哚美辛(indomethacin,INDO)、脂氧化酶抑制剂(nordihydroguiaretic acid,NDGA)、细胞色素P450氧化酶抑制剂酮康唑(ketoconazole,KETO)以及一氧化氮合成酶抑制剂N-硝基-L-甲酯精氨酸(N~G-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)对AngⅡ诱导的ROS产生均无明显影响。AngⅡ显著刺激NADPH氧化酶活化及p47phox和p67phox膜转位。3、AngⅡ可呈时间依赖性和剂量依赖性诱导系膜细胞EGFR磷酸化,100 nmol/L AngⅡ刺激30 min,EGFR磷酸化达到高峰,是对照组的3.96倍;AT1受体阻断剂losartan、抗氧化剂乙酰半胱氨酸(NAC)以及NADPH氧化酶抑制剂apocynin和DPI显著抑制AngⅡ诱导的EGFR磷酸化,同时EGFR拮抗剂AG-1478几乎完全阻断AngⅡ诱导的系膜细胞增殖。4、Losartan、NAC、apocynin、DPI和AG-1478阻断AngⅡ诱导的JNK/AP-1活化和系膜细胞增殖。 结论:ROS/EGFR/JNK/AP-1信号通路参与AngⅡ诱导的肾小球系膜细胞增殖。NADPH氧化酶抑制剂和EGFR受体拮抗剂能显著抑制AngⅡ诱导的系膜细胞增殖,可能具有一定的治疗作用。 selleck化学药品液面控制 本研究创新之处在於: 1.首次发现:AngⅡ可通过JNK—c-Jun/AP-1信号通路诱导肾小球系膜细胞增殖和MCP-1、TGF-β以及FN表达(参见:Zhang A,Ding G,Huang S,Wu Y,Pan X,Guan…
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05。(3)GCSsiRNA转染K562∕A02细胞24小时后,以Mock组为对照、GAPDH基因为内标,实验组GCS mRNA表

05。(3)GCSsiRNA转染K562∕A02细胞24小时后,以Mock组为对照、GAPDH基因为内标,实验组GCS mRNA表达水平明显受抑制,抑制率为69%(58~78% ), P 0.05。与GCSsiRNA转染K562/A02细胞24小时比较,转染48小时后MDR1mRNA表达下调65%(54~74%),P AUY-922分子量 0.05。(4)与K562/A02细胞空白组比较,转染72小时后GCSsiRNA组和MDR1siRNA组细胞P-gp表达的相对吸光度值分别下调1.44倍和3.54倍, P目的探讨IL-29和IL-10单独和联合脂多糖刺激Hela细胞后IL-15和IL-6转录水平的变化,分析其激活的信号转导通路。 方法培养的Hela细胞,经不同浓度的LPS及IL-10(IL-29)单独或联合处理后,提取细胞总RNA和总蛋白,RT-PCR分析IL-15和IL-6转录水平的变化,Western blot分析信号转导通路蛋白变化。 结果1. RT-PCR分析显示: ①1 ng~10μg LPS刺激Hela细胞12 h后,IL-15mRNA和IL-6mRNA水平均明显上调(与对照组比较:P0.05)。不同浓度的IL-10(1,10,100 ng/mL)均下调100 ng/mL LPS诱导的Hela细胞IL-15mRNA和IL-6mRNA的表达,且浓度越高IL-10抑制作用越明显。 ③单独IL-29(100ng/ml)作用能显著降低Hela细胞IL-15和IL-6转录水平。IL-29和LPS联合作用Hela细胞后,IL-29亦能显著抑制LPS诱导的IL-15和IL-6转录,并且在一定浓度范围内(80~240ng/ml)存在剂量依赖性(与LPS组比较,P0.05)。 结论IL-10和IL-29均能抑制LPS诱导的炎症细胞因子IL-15和IL-6的转录,且发现IL-10下调作用可能与其能阻断AKT的激活有关。因而,我们推测IL-29可能具有类似IL-10的抗炎作用,为某些临床感染性疾病的预防和治疗带来新的希望。为了研究氧化应激影响肉仔鸡肉品质的主要MAPK信号转导通路,论文分为肉仔鸡胸肌骨骼肌卫星细胞氧化应激模型优化,氧化应激状态下起主要作用的MAPK信号通路的筛选,抗氧化物质对信号通路的作用及维生素C和茶多酚对慢性应激条件下肉仔鸡生产性能的影响及其MAPK通路四个部分,采用细胞模型和动物应激试验相结合的方法,研究了氧化应激时MAPK信号通路的改变对鸡肉品质的影响机理。现分别摘要如下: 试验一肉仔鸡胸肌卫星细胞氧化应激模型的优化 MK-1775分子重量 【目的】以地塞米松(DEX)处理肉仔鸡胸肌卫星细胞(SCs),筛选DEX的最佳作用时间和浓度,以优化肉仔鸡卫星细胞的氧化应激模型。【方法】将体外培养的肉仔鸡胸肌SCs按DEX处理浓度(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48和0.96 mg/ml)分为7组,分别测定培养不同时间(6 h、12 h、24 h和48 h)点SCs的存活率(MTT法),细胞及培养液丙二醛(MDA)、氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转酶(GST)含量或活性。【结果】随DEX浓度升高,SCs中MDA和ROS含量极显著升高(P

天然小分子化合物鹅不食草有效成分6-氧-当归酰多梗白菜菊素(6-O-angeloylplenolin,6-OAP)对肺癌细胞的作用

天然小分子化合物鹅不食草有效成分6-氧-当归酰多梗白菜菊素(6-O-angeloylplenolin,6-OAP)对肺癌细胞的作用,及对表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor, EGFR)印制剂吉非替尼的增效作用。吉非替尼(Gefitinib)是1990年发现的一种表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(Epidermal growth factor receptor inhibitor, EGFR-TKI),之后的研究发现吉非替尼具有抑制肺癌细胞的生长、转移和血管生成,并且有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,适用于治疗以前接受过化学治疗的局部晚期以及转移性非小细胞性肺癌。基于现有的临床研究结果,吉非替尼对于那些适用的病例有很好的治疗效果,然而因为吉非替尼是激酶抑制剂的原因,所以长时间使用极其容易产生抗药性以及副作用,因此在使用吉非替尼的时候经常需要停药很长时间或者和其他药物一起使用。6-氧-当归酰多梗白菜菊素(6-O-angeloylplenolin,6-OAP)是从鹅不食草中提取的一种倍半萜类小分子化合物,研究发现其对多种肿瘤具有抑制作用。实验室的前期研究发现6-OAP靶向SCF复合物诱导细胞周期G2/M期阻滞的分子机理,并且具有适应的药代动力学特征。进一步我们发现6-OAP对多种肺癌细胞系具有抑制作用,并且在小鼠模型上也具有显著的抗癌效果,前期研究发现其对多种肿瘤具有抑制作用,并且可以增加地塞米松对骨髓瘤的敏感性。因此,我们探索了6-OAP与吉非替尼联合使用是否会克服吉非替尼的耐药性。吉非替尼是表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂,抑制其下游信号通路,6-OAP通过作用于SCF复合物也作用众多的细胞通路,通过对比发现6-OAP与吉非替尼的联合用药比两药单独使用有更好抑制细胞增殖的效果,使用软件计算协同指数。因此我们选用肺腺癌细胞系A549细胞作为我们研究的主要对象,发现6-OAP与吉非替尼的联合使用可以明显的抑制晓得侵袭转移的能力,并且有明显的统计学意义,进一步研究发现6-OAP联合吉非替尼可以明显下调p-AKT、p-ERK等蛋白的水平,增强吉非替尼的抗肺癌作用,为吉非替尼耐药的病人提供了新的治疗可能,为中医药联合西药治疗癌症增加了可能。2.西药治疗疾病的优势是作用机制比较清楚,针对的病症也比较清楚,而中医药的优势在于经过数千年的传承,对于治疗疾病有着自己一整套的完整体系,而具体的作用机制不清楚,这阻碍了中医药在全世界范围内的认可。因此筛取中药中的有效成分是刻不容缓,实验室中拥有众多中药提取物,我们使用多种癌症细胞用来筛取中药中可以抗击癌症细胞系的提取物。我们发现多种抗击癌症的活性成分,Evo是我们近期发现的一个新的天然小分子化合物,初步的研究发现Evo能抑制肿瘤细胞的增殖,诱导细胞在G2/M期阻滞,后续的研究正在进行中。沙门菌是一种革兰氏阴性兼性细胞内的细菌病原体,具有广泛的宿主谱,在全球范围内感染病例中均表现出有较高的发病率和死亡率。沙门菌的致病性主要依赖于其侵袭细胞及在细胞内生存的能力。而这又依赖于其两个毒力岛SPI-1及SPI-2编码的两个III型分泌系统(T3SS)。T3SS具有分泌和转导多种细菌毒力因子进入宿主细胞的功能。Sop selleck好不好 很少 B是SPI-1重要的分泌毒力因子,具有肌醇磷酸酶活性,在沙门菌侵入过程中可诱导多种磷酸肌醇的去磷酸化作用。Sop B已经被证明在侵染过程中影响多种细胞通路,包括细胞膜褶皱形成及抑制SCV与溶酶体的融合等。目前,对于Sop B功能的研究主要关注于其在沙门菌侵染及胞内存活过程中的作用。虽然有研究表明Sop B能够影响多种对炎性反应有调控作用的细胞信号通路,但Sop B是否影响炎性反应的报道仍不多见。炎性体是天然免疫系统的重要组成部分。炎性体是一种多蛋白复合体,在感染或应激条件下,促进促炎细胞因子成熟释放。炎性体组成包括:受体,接头蛋白及效应因子caspase-1。PRRs,包括NLR家族及ALR家族等都能启动炎性体的组装。活化的NLR或ALR促进ASC的聚集,而ASC的聚集招募caspase-1进入ASC斑点,启动caspase-1的自溶性活化,从而诱导的IL-1β及IL-18的蛋白水解过程。作为宿主重要的防御机制,炎性体的活化受到多种因素的严格调控,例如:受体的自抑制及修饰作用。病原同样可以利用毒力因子抑制炎性体功能,从而达到免疫逃逸的目的。既然,Sop B蛋白在沙门菌侵染及维持胞内存活都具有重要的作用,其是否影响沙门菌诱导的炎性体活化。因此,本研究利用λRed重组系统对沙门菌SL1344进行Sop 获悉更多 B编码基因的敲除,并以低拷贝的p STV28为表达载体分别构建了全长sop B基因回补质粒及sop B突变回补质粒。随后,将回补质粒电转至△Sop B菌株中,由此成功获得三株重组菌株,包括△Sop B::Vect,△Sop B::Sop B及△Sop B::C460S。炎性体活化试验中,为了探究Sop B蛋白是否影响沙门菌诱导的炎性体。应用ELISA方法检测Sop B对沙门菌诱导的IL-1β进行测定,LDH的释放分析细胞死亡,并应用Western blot分析caspase-1、IL-1β、AKT的活化情况及ASC寡聚化水平。免疫荧光分析ASC斑点形成水平等。结果显示沙门菌毒力因子Sop B通过诱导AKT信号活化显著抑制沙门菌诱导的炎性体活化。研究背景:乳腺癌是目前中国女性最常见的恶性肿瘤,也是全世界肿瘤致死的首要原因。三阴性乳腺癌是指免疫组织化学染色显示雌激素受体、孕激素受体和人类表皮生长因子受体2均为阴性的一种特殊的乳腺癌。三阴性乳腺癌约占乳腺癌的12-17%,比非三阴性乳腺癌的侵袭性更强、复发转移更早,在转移性乳腺癌中生存率更低,预后更差。此外,由于三阴性乳腺癌对内分泌治无反应,目前治疗主要以手术为主,辅以全身性化疗,但该肿瘤异质性大,临床预后差,寻找有效的分子指标和治疗靶点已迫在眉睫。LETM1蛋白是一种在人类及酵母中都较为保守的线粒体内膜蛋白,它能减少线粒体的生成及ATP的产生。其表达水平的异常能诱发线粒体功能的紊乱,从而导致包括肿瘤等人类多种疾病的发生。在人类众多恶性肿瘤中都发现LETM1蛋白表达水平显著升高,但是LETM1过表达在三阴性乳腺癌中的临床病理特点和预后意义仍不清楚。本研究旨在探讨LETM1蛋白过表达在三阴性乳腺癌中的临床预后评估意义。材料与方法:选取组织标本共214例,其中包括107例三阴性乳腺癌,42例导管内原位癌,65例癌旁正常组织。首先,应用细胞免疫荧光染色检测方法分析LETM1蛋白在MCF-7乳腺癌细胞中的定位情况。然后采用免疫蛋白印迹方法在三阴性乳腺癌组织中对LETM1蛋白进行相对定量,验证LETM1蛋白在三阴性乳腺癌中是否存在过表达。最后,采用免疫组织化学方法检测LETM1蛋白在三阴性乳腺癌、导管内原位癌及正常组织中的表达情况,并分析其蛋白表达在三阴性乳腺癌中的临床病理意义。结果:1.

5 cm处行腹主动脉缩窄术建立压力超负荷模型,3 d后各组给予相应药物干预。4周后取材,计算大鼠心脏指数(H/B)和左心室质量指数

5 cm处行腹主动脉缩窄术建立压力超负荷模型,3 d后各组给予相应药物干预。4周后取材,计算大鼠心脏指数(H/B)和左心室质量指数(left ventricular NVP-BGJ398数据表 mass index,LVMI);Masson染色光镜下观察心肌组织形态学改变,测算心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF);ELISA法测定血清转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)浓度;Western-blotting检测TGF-β1及Ⅰ型、Ⅲ型胶原纤维的蛋白表达量;RT-PCR检测心肌组织Smad3 mRNA、Smad7 mRNA的表达水平。结果与Sham组相比,AOB组大鼠H/B、LVMI、CVF、血清TGF-β1均明显升高(P

Expression of cytokine-induced neutrophilchemoattractant-1 was de

Expression of cytokine-induced neutrophilchemoattractant-1 was determined by enzyme immunoassay.RESULTS:Conventional subcultivation yielded activelygrowing cells.One clone was obtained after limiting dilution,and designated as SIPS.This cell line has been passagedrepeatedly more than 2 years,and is thus likely immortalized.SIPS cells retained morphological characteristics of…
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