Monthly Archive: February 2017

化合物H5r与HDAC2分子对接结果显示,H5r不仅能螯合锌离子,吗啉环上的氧原子以及嘌呤9位乙酰基氧原子还可以分别与Arg275

化合物H5r与HDAC2分子对接结果显示,H5r不仅能螯合锌离子,吗啉环上的氧原子以及嘌呤9位乙酰基氧原子还可以分别与Arg275和Phe210形成氢键,使得H5r的结合能力比SAHA更强。 本文共合成24个9-取代嘌呤异羟肟酸衍生物用于HDAC抑制活性的研究,结果表明IWR-1订单嘌呤衍生物可用于HDAC抑制剂的研究,并对肿瘤细胞有明显的抗增殖活性,其中H5r可以作为一个先导物,开发嘌呤类HDAC抑制剂,进行抗肿瘤活性研究。 综上所述,嘌呤衍生物由于结构可变性大、适于改造、水溶性好,且具有多种生物活性等特点,已被广泛用于寻找更多抗肿瘤活性的研究中。本论文分别针对CDK和HDAC两个靶点,对嘌呤类抗肿瘤药物进行系统深入的研究,设计合成了结构全新的化合物共130个,分别通过核磁、质谱进行了结构确证,并对74个目标终产物进行酶活性、抗肿瘤增殖活性的研究,对嘌呤类抗肿瘤药物的NVP-BKM120DMSO溶解度深入研究打下基础。第一部分新型阿霉素前体药PDOX对胃癌模型的疗效研究 背景与目的:胃癌死亡率在发展中国家位列第二,临床上常用治疗方法包括手术治疗、放疗、化疗及生物治疗等。化疗为进展期胃癌综合治疗的重要方式之一,如蒽环类药物多柔比星(Doxorubicin, DOX),因其临床有效且伴有显著心脏毒性而成为一把双刃剑。

临床上在放疗后使用G-CSF治疗发现,G-CSF能够诱发骨髓细胞功能耗竭。因此本课题进一步开展了SB联合G—CSF对不同剂量(2,

临床上在放疗后使用G-CSF治疗发现,G-CSF能够诱发骨髓细胞功能耗竭。因此本课题进一步开展了SB联合G—CSF对不同剂量(2,4,6Gy)γ射线全身照射小鼠造血免疫系统辐射损伤的治疗作用研究。 SB治疗组小鼠于照射后24小时第1次腹腔注射给药,以后隔天注射1次,共给药5次。G-CSF治疗组小鼠于照射后2小时和6小时后腹腔注射给药,剂量为1μg/只,以后每selleck screening library天注射两次,共6天。联合用药组小鼠同时腹腔注射两种药物。照射组和未照射组小鼠腹腔注射等体积的含30%DMSO的无菌对照溶液。 在小鼠接受7.2Gy全身照射后观察生存率,发现SB与G-CSF联合应用能显著提高小鼠生存率。利用粒—巨噬细胞集落形成实验(colony forming units-granulocyte-macrophage获悉更多,CFU-GM)对小鼠造血祖细胞功能进行检测,发现联合用药组小鼠骨髓细胞的克隆形成能力均高于SB或者G-CSF单独用药组。利用鹅卵石样区域形成细胞实验(cobblestone area-forming cell, CAFC)检测4Gy受照小鼠骨髓造血干细胞的功能,发现联合用药组小鼠第4周CAFC数高于照射组,SB或者G-CSF单独用BIBF 1120说明书药组。 对SB辐射损伤保护作用机制进行初步探索。检测小鼠骨髓细胞ROS水平,发现SB,G-CSF单独给药,以及联合给药组小鼠骨髓细胞ROS水平均低于照射组小鼠。体外实验在发现SB提高受照小鼠骨髓细胞克隆能力的基础上,利用MAPK信号转导通路PCR芯片筛选出p38在辐射损伤中16个可能调节的下游靶基因。SB除抑制MAPK信号通路外,还能调节CDK4/6, CyclinD2等周期蛋白及一些转录因子的表达来起作用。

EML4-ALK是一个新的驱动基因,它与患者临床病理特征的研究结果并不一致,原因有各研究采用的方法不同、研究人群不同、样本量不够大

EML4-ALK是一个新的驱动基因,它与患者临床病理特征的研究结果并不一致,原因有各研究采用的方法不同、研究人群不同、样本量不够大,有的研究人群经过筛选等,在大样本随机患者中筛查EML4-ALK重排的研究很少,尤其是在中国肺腺癌患者中的研究更为少见,此外,探讨ALK重排在肺癌患者的预后意义的研究也很少报告。EML4-ALK融合基因的检测方法有三种,荧光原位杂交(Fluorescence in selleck HPLC控制situhybridization,FISH)、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)、逆转录聚合酶链反应(Reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR),三种方法各有优缺点,在大样本患者中比较三种方法的研究较少。KRAS是最早发现的驱动基因,尚无理想的靶向药物,KRAS对预后的RapamycinDMSO溶解度预测价值也存争议。 针对以上的问题,我们设计在大样本随机肺腺癌患者中筛查EGFR、EML4-ALK、KRAS三个驱动基因,探讨三个基因与肺腺癌患者的临床特征、治疗疗效及预后的关系,并探讨FISH、Ventana IHC、RT-PCR方法检测ALK重排的作用,对临床个体化治疗具有非常重要的指导意义。 包括三部分内容: 第一部分:检测430例肺腺癌患者的EGFR基因状态,TSA HADC化学结构分析EGFR状态与临床病理特征、治疗疗效及预后的关系。430例患者中,186例(43.3%)患者携带EGFR突变;女性EGFR突变高于男性,不吸烟患者高于吸烟患者;三种主要腺癌亚型中,乳头状为主型EGFR突变率高于腺泡样为主型和实体型为主腺癌;EGFR状态与化疗疗效无关,EGFR突变是EGFR TKI(sTyrosine kinase inhibitors)疗效的预测因子;多因素分析显示EGFR突变是预后独立因素,EGFR突变患者预后优于野生型患者。

结果:(1)SAHA对T淋巴细胞增殖、活化和分化的影响: SAHA呈时间及剂量依赖性的抑制CD4~+和CD8~+T淋巴细胞增殖;高

结果:(1)SAHA对T淋巴细胞增殖、活化和分化的影响: SAHA呈时间及剂量依赖性的抑制CD4~+和CD8~+T淋巴细胞增殖;高浓度SAHA显著抑制CD25和NF-κB表达,而CD69在活化后2h,6h和12h均无显著改变,提示SAHA影响T细胞中后期活化;SAHA阻断IL-2、IFN-γ、IL-12、TNF-α、和IL-10等促Selleck炎细胞因子表达;SAHA呈时间及剂量依赖性的促进T细胞凋亡。同时显著抑制体外诱导的Th17分化,提示高浓度SAHA可通过干预T淋巴细胞活化和众多促炎基因表达发挥免疫抑制作用。(2)SAHA在体外对Treg细胞的诱导作用:随着SAHA浓度的增加, CD4~+Foxp3~+T细胞所占的比例显著降低,高浓度SAHPD0332991化学结构A显著下调Foxp3基因表达,而低浓度SAHA(0.1μM)轻度增加了Treg的比例,但没有上调FOXP3表达,流式检测显示低浓度SAHA选择性诱导Teff细胞凋亡,从而间接增加了Treg比例。尽管荧光定量PCR检测显示SAHA在体外不能促进Treg扩增或Teff向Treg转化,但SAHA可通过上调CTLA点击此处-4增强Treg的抑制功能。(3)SAHA对Th17分化的影响:流式检测显示SAHA(0.1-1μM)显著抑制IL-17A表达,低浓度SAHA显著抑制IL-17A、IL-17F和STAT3表达,而不影响RORγt,提示SAHA可能通过抑制STAT3通路抑制Th17分化。有趣的是,与对照组相比,SAHA处理后的Th17中FOXP3表达显著上调,显示SAHA可能参与调控Treg和Th17平衡。

维、汉乳腺癌组织中mTORmRNA2-ΔΔct平均值分别为10 88和19 7,差异有统计学意义(p=0 045),4EBP1mR

维、汉乳腺癌组织中mTORmRNA2-ΔΔct平均值分别为10.88和19.7,差异有统计学意义(p=0.045),4EBP1mRNA2-ΔΔct平均值分别为52.72和80.74,差异无统计学意义(p=0.128),S6K1mRNA2--ΔΔct平均值分AZD2281化学结构别为7.97和17.92,差异无统计学意义(p=0.404)。结论:mTOR信号通路及其下游分子4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌组织中被显著激活。磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1表达的调控位点可能位于转录后水平或蛋Mdm2抑制剂白质水平。p-4EBP1在维吾尔族中的表达显著升高,可能成为研究维、汉不同民族之间乳腺癌差异的原因之一。维、汉之间mTOR及其下游分子mRNA与磷酸化蛋白检测的结果不一致,因而mRNA的检测不能代表维、汉乳腺癌中mTOR信号通路的点击此处激活状态。 第一部分:mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌中的表达和临床意义 目的:探讨磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌组织和癌旁组织中的表达部位、表达量以及蛋白表达的相关性。探讨磷酸化mTOR、4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌患者当中与各临床指标以及预后的关系。

pEasy-KIF5B、pEasy-RET V2、pEasy-RET V4质粒酶切条带位置与理论大小相符,测序鉴定结果和标准序列基

pEasy-KIF5B、pEasy-RET V2、pEasy-RET V4质粒酶切条带位置与理论大小相符,测序鉴定结果和标准序列基本完全吻合。KIF5B-RET V2-pCDH、KIF5B-RETV4-pCDH慢病毒穿梭质粒酶切条带位置与理论大小相符,测序鉴定结果和标准序列基本完全吻合。pCDH-CMV-MCS-EGFP重组慢病毒载体转染293T细胞及BEAApoptosis Compound Library screeningS-2B细胞48小时荧光蛋白表达强,荧光亮度90%以上。RT-PCR检测结果显示KIF5B-RET-PCDH慢病毒转染BEAS-2B细胞后KIF5B-RET融合基因mRNA表达明显,Western blot检测结果显示KIF5B-RET v2-PCDH’慢病毒转染BEAS-2B细胞后KIF5B-RET融合蛋白表达明显。经去血清处理1和2小时后,KIF5B-RET V2转染BEAS-2B细胞发生凋亡的比例为5.49%、5.98%、5.6%,EGFP转染BEAS-2B细胞发生凋亡的比例为14.56%、15.28%、15.17%,两者差异具有统计学意义(p研究目的:目前肺癌是人类常见的恶性肿瘤之一,在中国因肺癌死亡人数已经居于癌症死亡率首位。非小细胞肺癌(non-Sellecksmall cell lung cancer,NSCLC)约占所有肺癌的80%~85%,其中约25%~30%就诊时已是疾病晚期,约40%~50%已有远处转移,因而失去最佳手术切除机会,全身化疗及放疗是其主要的治疗手段。目前,以铂类为基础联合第三代抗肿瘤药物(吉西他滨、长春瑞滨、紫杉类药物等)的化疗方案是晚期NSCLC的标准治疗方案,但化疗有效率也仅为30%~40%,并且很多患者出现呕吐,脱发等严重副反应,难以耐受。

4 Western blot实验表明,在对照siRNA转染的细胞中,PS-341诱导TNFRSF10B上调,CASP8、CASP

4. Western blot实验表明,在对照siRNA转染的细胞中,PS-341诱导TNFRSF10B上调,CASP8、CASP9、CASP3活化和PARP1失活,但在ATF3 siRNA转染的细胞中这些现象受到明显抑制;SRB实验显示抑制ATF3增强了肿瘤细胞的存活:流式细胞术分析细胞凋亡发现PS-341诱导的对照siRNA转染哪里的细胞凋亡率为41%,ATF3 siRNA转染的凋亡细胞只有26%。5.在H460、A549、H157细胞中,敲低ATF4表达抑制PS-341诱导的TNFRSF10B上调和CASP级联反应,同时PS-341诱导的细胞凋亡百分比从29%降低到19%。6.在H460、A549、H157细胞中,抑制ATF4表达降也许低了PS-341诱导的ATF3和DDIT3上调;在H157和Calu-1细胞中,抑制ATF3表达,PS-341诱导的DDIT3上调受到轻微抑制,但ATF4表达不变;另一方面,敲低DDIT3表达,ATF3表达轻微降低,ATF4表达仍没有变化。利用蛋白质免疫共沉淀技术进一步研究ATF3和DDIT3之间的关系,发AC220 花费现DDIT3与ATF3相互结合形成复合物。7.当PS-341作用于细胞时,MAPK1和RPS6KA3的磷酸化水平明显升高,并呈剂量和时间依赖性。在多种细胞中,用MRK特异抑制剂U0126抑制MAPK1和RPS6KA3活化,发现PS-341诱导的TNFRSF10B上调受到显著抑制。8. Western blot实验发现PS-341诱导PKCδ切割活化,产生41kD片段,并呈剂量和时间依赖性。

本文讨论cMET信号通路在HCC中的作用,总结c-MET受体抑制剂
目的:探讨Ⅱ型c GMP依赖性蛋白激酶(typeⅡc

本文讨论cMET信号通路在HCC中的作用,总结c-MET受体抑制剂目的:探讨Ⅱ型c GMP依赖性蛋白激酶(typeⅡc GMP-dependent protein kinase,PKGⅡ)对血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)介导的人胃癌HGC-27细胞增殖的影响及其作用机制。方点击此处法:应用编码PKGⅡc DNA的腺病毒(Ad-PKGⅡ)感染HGC-27细胞,使其高表达PKGⅡ,并以特异性激动剂8-p CPTc GMP激活PKGⅡ。应用血管内皮生长因子-A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)激活VEGFR2。MTT法检测细胞增殖;蛋白质印迹法检测p-VEGFR2、磷酸化蛋白激www.selleckchem.cn/products/jq1.html酶B(phosphorylated-protein kinase B,p-PKB/p-Akt)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylated-extracellular signal-regulated kinase,p-ERK1/2)表达;免疫共沉淀法检测PKGⅡ与VEGFR2的结合;免疫沉淀法联合蛋白质印迹法检测PKGⅡ对VEGF更多R2丝氨酸/苏氨酸(Serine/Threonine,Ser/Thr)的磷酸化作用。结果:VEGF-A可促进HGC-27细胞增殖,并诱导胞内p-VEGFR2、p-Akt和p-ERK1/2表达水平明显升高;以Ad-PKGⅡ感染HGC-27细胞使其高表达PKGⅡ并激活后,VEGF-A引起的细胞增殖受到明显抑制,pVEGFR2、p-Akt和p-ERK1/2表达水平显著降低;PKGⅡ可与VEGFR2相互作用,使后者丝氨酸/苏氨酸磷酸化。

4 SMU-B在体外能抑制外源性HGF诱导的人A549肺癌细胞的迁移和跨膜移动,具有抗肿瘤细胞的迁移和侵袭作用。 5 SMU-

4. SMU-B在体外能抑制外源性HGF诱导的人A549肺癌细胞的迁移和跨膜移动,具有抗肿瘤细胞的迁移和侵袭作用。 5. SMU-B在体外能显著抑制外源性HGF诱导的A549肺癌细胞c-Met、AKT及ERKl/2蛋白的磷酸化;也能在体外抑制GTL-16胃癌细胞和在体内抑制GTL-16胃癌裸鼠异体移植瘤的c-Met、AKT和ERK1/查找更多2蛋白的磷酸化,通过抑制c-Met信号通路发挥抗肿瘤作用。伴随着血管生成而形成的肿瘤血液供应是实体瘤发生发展的关键步骤。普遍认为只有内皮细胞可以形成血管,但当内皮依赖的血管生成不能满足肿瘤的快速增殖时,一种重要的替代供血方式出现,即由肿瘤来源的非内皮细胞形成血管样网络—血管生成拟态(VasculogeniCP690550c mimicry, VM)。VM是部分肿瘤增殖早期获得供氧的主要途径,对肿瘤的生长和转移具有重要作用。目前仅有一项临床研究表明抗血管内皮生长因子受体2 (Vascular endothelial growth factor receptor 2, VEGFR2)拮抗剂改善胃癌(Gastric cancer,{Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection…
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19 在H1792细胞中转染pEGFP-CFLARL与pEGFP-CFLARL-R122A质粒或pEBG-CFLARl与pEBG-

19.在H1792细胞中转染pEGFP-CFLARL与pEGFP-CFLARL-R122A质粒或pEBG-CFLARl与pEBG-CFLARL-R122A质粒,并用SAHA处理,发现在过表达CFLARL-R122A的细胞中,SAHA诱导的凋亡相关蛋白CASP8、 CASP3的活化和PARP1的失活明显降低。20.蛋白质免疫沉淀实验显示CFLARL存在乙酰化selleck产品修饰。结论1.PS-341增加非小细胞肺癌细胞中DDIT3表达,DDIT3增强PS-341诱导的TNFRSF10B上调和细胞凋亡。2.PS-341激活非小细胞肺癌细胞中内质网应激反应。3.ATF3增强PS-341诱导的TNFRSF10B上调和细胞凋亡。4.ATF4促进PS-341诱导的TNFRSF10B表达和细胞凋亡。5.ATF4Pazopanib体外上调ATF3和DDIT3表达,ATF3和DDIT3形成复合物共同调节TNFRSF10B的表达。6. MAPK1/RPS6KA3信号通路调控PS-341诱导的TNFRSF10B表达。7.PS-341切割活化PKC△并诱导PKC△发生核转位;PKC△通过MAPK1/RPS6KA3信号通路和随后的内质网应激反应促进PS-341诱导的TN查找更多FRSF10B表达和细胞凋亡。8.PKCA通过内质网应激反应增强PS-341诱导的TNFRSF10B表达和细胞凋亡。9.抑制PADI4表达抑制了CFLARL 的表达并促进了CFLARL与XRCC6结合。10. CFLARL存在精氨酸甲基化修饰。11.抑制CFLARL的精氨酸甲基化抑制了CFLARL与XRCC6结合,增加了CFLARL的稳定性并降低了SAHA诱导的细胞凋亡。12. CFLARl存在乙酰化修饰。