Monthly Archive: February 2017

第一个以驱动基因为靶点的成功范例是EGFR TKIs(Tyrosine kinaseinhibitor)治疗EGFR突变患者的有效

第一个以驱动基因为靶点的成功范例是EGFR TKIs(Tyrosine kinaseinhibitor)治疗EGFR突变患者的有效率达70%,疾病无进展生存期(progression-free survival,PFS)也显著延长,使得肺癌的治疗模式发生了革命性的改变,第二个成功的范例是克唑替尼治疗ALK阳性患者的有效率约selleck60%,2年生存率达50%,也显著优于传统的化疗疗效。 研究已证实EGFR突变是EGFR TKIs疗效和PFS最强的预测因素,但EGFR突变是否为非小细胞肺癌患者的预后预测因子仍存在争议。EML4-ALK是一个新的驱动基因,它与患者临床病理特征的研究结果并不一致,原因有各研究采用的方法不同、研究人不群不同、样本量不够大,有的研究人群经过筛选等,在大样本随机患者中筛查EML4-ALK重排的研究很少,尤其是在中国肺腺癌患者中的研究更为少见,此外,探讨ALK重排在肺癌患者的预后意义的研究也很少报告。EML4-ALK融合基因的检测方法有三种,荧光原位杂交(Fluorescence in situhy没有bridization,FISH)、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)、逆转录聚合酶链反应(Reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR),三种方法各有优缺点,在大样本患者中比较三种方法的研究较少。KRAS是最早发现的驱动基因,尚无理想的靶向药物,KRAS对预后的预测价值也存争议。

在多种肿瘤组织中发现HGF/c-Met信号通路异常活化-这种异常活化参与并调控这些肿瘤的发生、发展或转移。由于c-Met是导致肿瘤

在多种肿瘤组织中发现HGF/c-Met信号通路异常活化-这种异常活化参与并调控这些肿瘤的发生、发展或转移。由于c-Met是导致肿瘤形成及转移的许多通路的交叉点,以c-Met为靶标可相对较容易地实现对许多通路的同时干扰,因而,c-Met是抗肿瘤转移治疗的一个极有希望的靶点,已成为抗癌药物研究的热点领域之一。目前,已经发现了许多能够阻断HGFA-1210477供应商/c-Met信号传导途径的化合物,其中小分子c-Met激酶抑制剂已经成为研究的重点。 本课题以Pfizer开发的1-(喹啉-6-基甲基)-3H-[1,2,3]三唑[4,5-b]吡嗪类化合物PF-04217903、Janssen开发的3-(喹啉-6-基甲基)-3H-[1,2,4]三唑[4,3-b]哒嗪类化合物JNJ没有-38877605、SGX公司的三唑哒嗪类化合物SGX-523以及课题组前期研究的2,3,4,5-四氢-1H-吡啶并[4,3-b]吲哚类、螺[吲哚啉-3,4’-哌啶]-2-酮类专利化合物为先导化合物,基于激酶的”DFG-in”构象的晶体结构和I型抑制剂的药效团模型,结合三唑类I型c-Met抑制剂的构效关系,总结了此网站国际知名药企对该类化合物的优化改造经验,通过生物电子等排体原理、拼合原理及分子对接等手段设计合成了一系列新化合物采用定向合成和其它化合物制备技术,合成这些化合物。然后对合成的衍生物进行活性评价,筛选出活性更好的化合物,采用分子对接对设计的化合物与c-Met结合情况进行了初步的分析和探讨,结合化合物的活性情况,进行了初步构效关系分析,为开发具有临床应用价值的c-Met酪氨酸激酶抑制剂奠定基础。

结果:41例骨肉瘤患者中,VEGF和BMP-2阳性表达率分别为68 2%(28/41)和61 0%(25/41),与肿瘤大小、Pr

结果:41例骨肉瘤患者中,VEGF和BMP-2阳性表达率分别为68.2%(28/41)和61.0%(25/41),与肿瘤大小、Price,s分级、Dahlin,s组织学分型等无关(P>0.05)。VEGF阳性组BMP-2阳性率及MVD(分别为75%和40.25±8.02)与VEGF阴性组BMP-2阳性率及MVD(分别为30.8%和15.54±5.87)相比,差异有显著意义(P

将两株菌中的Pci-RpdA进行二级结构预测,发现由于57位氨基酸的突变,在野生菌株ATCC38065中Pci-RpdA蛋白的第5

将两株菌中的Pci-RpdA进行二级结构预测,发现由于57位氨基酸的突变,在野生菌株ATCC38065中Pci-RpdA蛋白的第59-60位氨基酸残基所形成的卷曲结构,在IMB002菌株中形成了一个小的B-折叠结构;596位氨基酸的突变,对蛋白二级结构没有造成影响。由于基因序列在第718位和1141位核酸序已经列的突变,使得桔青霉野生菌株ATCC38065中第240位缬氨酸残基和第381位丙氨酸残基,在工业型菌株IMB002分别突变成了异亮氨酸和苏氨酸。240位氨基酸的突变,对蛋白二级结构没有造成影响。由于381位氨基酸的突变,在野生菌种ATCC38065中Pci-HdaA蛋白的第366那个-380位氨基酸残基所形成的α-螺旋结构,在IMB002菌株中缩短至366-377位。 结论:克隆了桔青霉的组蛋白去乙酰化酶基因Pci-RpdA和Pci-HdaA,为后续对桔青霉进行表观遗传育种奠定基础。得到了在大肠杆菌中重组表达的RpdA蛋白,为后续酶活表征该蛋白提供物质基础。详www.selleckchem.cn/products/3-methyladenine.html细了解了Pci-RpaA和与Pci-HdaA及其编码产物的结构特征,发现了Pci-RpdA在发酵前期相对高表达、Pci-HdaA在发酵中后期相对高表达的重要特征,为进一步研究两基因的功能提供理论依据。比较了两基因在野生菌株和工业菌株中的序列差异,为探讨组蛋白去乙酰化酶与菌株高产代谢产物的相关性提供研究线索,也为揭示真核生物中复杂的表观遗传调控机制提供研究素材。

4 2KDR突变组与野生组ORR(18 8%vs 14 3%)和DCR(68 8%vs 76 2%)差异无统计学意义(P>0 05

4.2KDR突变组与野生组ORR(18.8%vs.14.3%)和DCR(68.8%vs.76.2%)差异无统计学意义(P>0.05),提示KDR突变与化疗疗效无相关性。 4.3KRAS突变组与野生组ORR(33.3%vs.13.5%)和DCR(83.3%vs.78.8%)差异无统计学意义(P>0.05),提示KRAS突变与化疗疗效无相关性。 5.驱不动基因与EGFR-TKI疗效的相关性: 5.1EGFR突变组与野生组中位PFS(6.8个月vs.5.3个月)差异有统计学意义(P=0.033),提示EGFR突变型TKI疗效优于野生型。 5.2KDR突变组与野生组中位PFS(4.5个月vs.4.2个月)差异无统计学意义(P>0.05),提示KDR突变与TKI疗效无相关性。 selleck化学 llc5.3KRAS突变组与野生组中位PFS(5.3个月vs.5.5个月)差异无统计学意义(P>0.05),提示KRAS突变与TKI疗效无相关性。 6. EGFR、KDR、KRAS突变组与野生组在生存期中的差异均无统计学意义(P>0.05)。 7.多因素Cox回归分析显示:性别、淋巴结转移和临床分期是影响NSCLC预后的独立影响很少因素。 8. EGFR、KDR、KRAS三个基因突变之间均无相关性(P>0.05)。 结论: 1. EGFR仍是国内NSCLC最常见的驱动基因,其突变位点90%以上位于19、21外显子,KDR基因突变位点集中于6、7和11外显子,KRAS突变常发生于2号外显子。 2.女性、腺癌、不吸烟、中-高分化患者是EGFR基因高突变人群;KDR突变在淋巴结转移的晚期患者中突变率高;KRAS突变在吸烟人群中多见。

目前内分泌治疗药物如芳香化酶抑制剂、三苯氧胺(TAM)等的疗效已得到确认,但因其本身的诸多副作用以及激素受体表达水平的不同,而大大

目前内分泌治疗药物如芳香化酶抑制剂、三苯氧胺(TAM)等的疗效已得到确认,但因其本身的诸多副作用以及激素受体表达水平的不同,而大大限制了它们的临床应用。能否有一种药物能够取代这些药物,并能减少这些药物的不良反应,正是我们研究的重点。 米非司酮(mifepristone,MIF,RU486)是一种强抗孕激素类物,对糖皮质激素受体(glucoconicoid receptor,Fludarabine制造商GR)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)都具有较强的亲和力。同时,米非司酮还具有增强抗癌药物疗效、抗肿瘤等其它一些新的用途。有研究发现,progestogen在体外实验中有诱导乳腺癌细胞增殖的作用,而米非司酮做为孕激素受体拮抗剂,可以竞争性的拮抗孕激素与其受体的结合,故米非司酮可用于乳腺癌的内分泌治疗。并且已经有研究显17-AAG浓度示米非司酮对孕激素受体(+)的乳腺癌细胞的增殖有一定的抑制作用。以往许多学者认为米非司酮的抗肿瘤作用与其抗孕激素的作用密不可分,但是米非司酮在孕激素受体(-)的乳腺癌中也同样表现出的抗癌作用表明:米非司酮不仅仅是通过抗孕激素这单一途径发挥抗癌作用,其作用机制可能远比我们想象的复杂多变,即米非司酮可以在不同的条件下通过不同的作用机制来发挥抗肿瘤作用。PD0325901购买 目的:在体外环境下,观察不同浓度的米非司酮对乳腺癌细胞株MCF-7、T47D的增殖、凋亡以及与之相关的BRCA1/BRCA2基因表达的影响。是为了探讨米非司酮对乳腺癌细胞的增殖、调亡以及相关基因的可能作用机制,并且为乳腺癌内分泌治疗的临床用药提供一定的理论指导。 方法: MCF7细胞、T47D细胞各一株,使用DMEN高糖、RPMI1640培养基培养,传代使生物学性状稳定后后,取生长状态良好的细胞接种至孔板内或细胞培养瓶中。

经过前期的研究本实验室已经建立了K562细胞Imatinib耐药株,并对其耐药机制做了初步的探讨。本研究在此基础上增加耐药株对Im

经过前期的研究本实验室已经建立了K562细胞Imatinib耐药株,并对其耐药机制做了初步的探讨。本研究在此基础上增加耐药株对Imatinib的耐药浓度至7μmol/L建立K562/G7.0细胞,然后观察一系列Imatinib不同耐药程度的K562/G细胞系包括K562/G01、K562/G3.0、K562/G5.0、K562/G7.0的生生物学特性及耐药机制的变化,EGFR activation并通过蛋白质组学技术分析不同耐药株及K562亲本株之间的差异蛋白,以期望发现新的克服Imatnib耐药的分子靶点。 首先通过MTT法观察K562及不同耐药细胞株对Imatinib的耐药程度,其IC50值分别为0.36、4.84、14.06、36.65、51.26μmol/L,细胞生长曲线结果显示各细胞株倍增时间无明显变化,另外,通过流式细胞术PR-171细胞系检测各细胞株之间周期分布的差异,结果表明随耐药浓度的增加处于G2/M期的细胞呈现递增趋势,以上结果表明,体外建立的K562不同耐药程度的Imatinib耐药株生物学特性有一定的改变。 此后,本实验对不同K562/G系列细胞的耐药机制进行研究。通过对不同细胞株Abl的ATP结合区基因序列进行扩增后测序未发现耐药细胞中有位点突变现象。而后通过免疫Apoptosis Compound Library数据表印迹杂交的方法检测各细胞株Imatinib耐药相关蛋白的表达情况,结果显示耐药程度不同各细胞表现一定的耐药机制的改变,其中K562/G01细胞Bcr-Abl、p-gp及Lyn均较K562细胞表达水平增高,随着耐药浓度的增加K562/G3.0细胞p-gp表达降低,Bcr-Abl及Lyn表达持续增加,耐药程度进一步增加,K562/G5.0及K562/G7.0细胞中Bcr-Abl表达水平反而降低,表现为Lyn依赖型耐药机制。

MiR-21已于多种肿瘤中被证实可以增加侵袭和转移的程度,包括乳腺癌,结肠癌,以及胶质瘤。TWIST1作为转录因子可以激活miR-

MiR-21已于多种肿瘤中被证实可以增加侵袭和转移的程度,包括乳腺癌,结肠癌,以及胶质瘤。TWIST1作为转录因子可以激活miR-10b,而后者又参与了TWIST1介导的上皮间质转化过程。肿瘤的侵袭和转移是判断肿瘤预后的主要病理指标,而miRNAs可以作为新的判断预后指标以及为临床治疗提供新的作用靶点,因此研究不同miRNAs在肿瘤发生进展中的特定作PI3K抑制剂用十分重要。 研究目的:miRNAs作为内源性非编码小RNA,在肿瘤的发生进展中发挥着重要的作用。在肿瘤细胞中多数miRNAs表达降低,功能受到抑制,提示其可能起到抑制肿瘤作用。然而,miRNAs抑制肿瘤的具体机制尚不明确。我们的实验目的在于研究miR-34b在非小细胞肺癌(non-small cell lung cance购买MLN2238r, NSCLC)中的作用以及作用机制。我们的研究发现肿瘤组织中相比邻近癌旁组织,miR-34b出现明显下降。体外功能实验证实miR-34b促进凋亡,抑制细胞增殖,从而发挥抑制肿瘤的作用。另外,我们还检测了miR-34b与靶标蛋白c-Met以及HGF/Met信号通路的相关性。 研究方法:收集术后非小细胞肺癌与邻近的癌旁组织,AUY-922分子量并培养非小细胞肺癌细胞系A549与SPC-A-1.应用实时定量PCR技术检测非小细胞肺癌组织miR-34b的表达水平,并且分析其与临床病理参数之间的统计学意义。应用细胞转染技术获得miR-34b高表达细胞,并检测细胞凋亡与细胞增殖。运用免疫组织化学方法探索miR-34b表达与下游蛋白c-Met, p53以及Mdm2之间的相关性。 对于miR-34b在非小细胞肺癌与邻近癌旁组织中的表达差异应用两样本t检验。

3 Cripto-1、β-catenin蛋白随内异症临床分期存在差异性表达,可望作为评估内异症病情严重程度及病情进展的指标。 4

3.Cripto-1、β-catenin蛋白随内异症临床分期存在差异性表达,可望作为评估内异症病情严重程度及病情进展的指标。 4.Cripto-1与β-catenin蛋白在子宫内膜异位性疾病中的在位内膜、异位内膜中呈负相关,提示二者可能共同参与异位病灶形成。研究背景:原发性肝细胞癌(HCC)恶性程度高、预后差,是危害我国居民健selleck抑制剂康的重大疾病,而其多药耐药(MDR)现象更是影响内科药物治疗疗效的重要因素。深入探讨HCC恶性增殖和药物抵抗的机制、寻找有效的干预靶点已经成为肝癌研究的热点。肝癌细胞始终处于病毒感染、营养缺乏、炎症刺激等各种不良的微环境中,这些不良刺激加上肿瘤的恶性增殖会使得大量未折叠/错误折叠蛋白在内质网腔内的积聚,导Ruxolitinib 花费致内质网应激(ERS)状态。研究证实,ERS以及其引发的未折叠蛋白反应(UPR)与众多的细胞内信号转导途径相关,因此探讨ERS状态下的肝癌细胞增殖、生存和死亡的机制具有重要的意义。自噬是细胞在缺氧、营养缺乏环境下通过自身降解来维持生存和细胞稳态的重要机制。近年研究表明,自噬与肿瘤的发生发展及肿瘤的治疗均有时间密切关系,但自噬究竟是发挥促癌还是抑癌的作用目前尚无定论。研究ERS状态下肝癌细胞的自噬活性的变化,以及自噬在肝癌细胞生存和死亡中的作用有助于进一步阐明肝癌的恶性生物学的分子基础和药物抵抗机制。 研究目的:①观察ERS诱导剂衣霉素(TM)对肝癌细胞自噬活性的影响;②研究细胞自噬在ERS诱导的肝癌细胞死亡中的作用;③探讨化疗药物对肝癌细胞自噬的影响及调控自噬对肝癌细胞药物敏感性的影响。

采用噬菌体展示技术和HER2-domain II蛋白片段作为抗原筛选人源单域抗体文库。经过5轮文库的筛选富集后,采用多克隆噬菌体E

采用噬菌体展示技术和HER2-domain II蛋白片段作为抗原筛选人源单域抗体文库。经过5轮文库的筛选富集后,采用多克隆噬菌体ELISA和单克隆噬菌体ELISA方法进一步筛选抗HER2-domain II的单域抗体,并获得单域抗体的DNA序列。采用原核细胞可溶性表达方法制备和纯化抗HER2-domain II的单域抗体蛋白,采用ELISA鉴定纯化的单域抗体与HER2-dIdelalisib体外omain II的结合能力,采用非竞争性ELISA检测单域抗体与HER2-domain II的亲和力。第二部分,筛选抗FGFR2的人源单域抗体。采用辅助噬菌体侵染制备人源单域抗体噬菌体文库,通过人工合成的方法制备FGFR2蛋白片段。采用噬菌体展示技术筛选抗FGFR2蛋白片段的单域抗体,经过5轮文库的筛选富集后,采用多克隆噬菌体ELISA和单克隆噬BGB324 花费菌体ELISA方法进一步筛选抗FGFR2蛋白片段的单域抗体,并获得单域抗体的DNA序列。结果:第一部分,筛选抗HER2的人源单域抗体。利用辅助噬菌体侵染制备了滴度为3.41×1013/ml的人源单域抗体噬菌体文库。通过原核细胞包涵体表达纯化得到了HER2-domain II蛋白,SDS-PAGE电泳图显示较高的蛋白纯度;非还原性SDS-PAGE电Dabrafenib浓度泳图显示HER2-domain II蛋白约为12 kDa。经过噬菌体展示技术5轮筛选后,抗HER2-domain II的单域抗体的滴度逐渐上升。采用多克隆噬菌体ELISA检测发现第3轮富集的单域抗体具有最强的的结合能力。从筛选后的文库里随机挑选196个单域抗体克隆,采用单克隆噬菌体ELISA检测得到了8个阳性单域抗体;采用单克隆噬菌体ELISA和多个无关抗原检测发现这8个阳性单域抗体能与HER2-domain II特异性结合。