miRNA-218下调TIAM1,MMP2和MMP9抑制骨肉瘤细胞迁移侵袭的实验研究

有研究显示,miRNA参与肿瘤的进展,然而下调的miRNA在肿瘤进展中的作用一直不明确。基于此,本课题主要研究miR-218在骨肉瘤进展中的作用。我们首先检测了骨肉瘤组织、癌旁组织以及人类骨肉瘤细胞系Saos-2细胞中miR-218的表达,SB202190,然后对miRNA218在骨肉瘤细胞中的作用进行了深入的研究。将miR-218表达载体转染入Saos-2细胞后,我们分别用ATPlite的实验方法检测了细胞的增殖变化,细胞划痕实验检测了细胞的迁移能力,transwell实验检测了细胞的侵袭能力。我们进一步预测和证实了miR-218作用的靶基因。结果显示,Saos-2细胞转染了miR-218表达载体后,其增殖能力、迁移和侵袭能力明显被抑制。Westernblotting结果表明miR-218的表达可以抑制T-细胞淋巴瘤侵袭和转移因子1(TIAM1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和9(MMP9)从而确定了miR-218作用的靶基因为TIAM1、MMP2和MMP9。以上结果提示miR-218可以通过下调骨肉瘤细胞中TIAM1、MMP2和MMP9的表达发挥抗肿瘤的作用。Abexinostat
通过AnnexinV及PI的染色分析发现miR-218本身并不能促进Saos-2细胞的凋亡,但有趣的是miR-218可增加Saos-2细胞对化疗药物多柔比星的敏感性,可以增强多柔比星的肿瘤细胞杀伤作用。最关键的体内实验同样证实,miR-218高表达的Saos-2细胞的生长被明显抑制,其荷瘤小鼠的生存率显著高于野生型Saos-2及空载体转染的Saos-2细胞荷瘤小鼠。同时还发现,经多柔比星处理后,其抗瘤效果更加显著。说明miR-218不仅本身对Saos-2肿瘤的生长具有抑制作用,且同时增加Saos-2细胞对化疗药物多柔比星的敏感性,与化疗药物具有协同抑制肿瘤生长的作用。
结果
非CAD组患者血浆HDL-C明显高丁CAD组,男性比例明显低于CAD组,血糖异常比例明显低于CAD组;PCI-24781,UAP组患者冠脉病变程度明显重于SAP组;非CAD组、SAP组、UAP组患者血浆GDF-15水平依次升高:血浆GDF-15水平与年龄、血糖异常、冠脉病变程度呈显著正相关。BMI、HGB、GDF-15水平与入院行冠脉造影检查的非心梗患者的预后独立相关;冠脉病变程度与CAD患者一年预后独立相关;非CAD患者血浆GDF-15水平大于1200ng/L组预后较差;血糖异常进展者基础GDF-15水平高:GDF-15水平大于900ng/L的CAD患者接受介入治疗可明显获益。
结论
GDF-15与传统心血管危险因素和冠脉病变程度相关,其水平升高提示患者无终点事件生存率低并更容易进展为血糖异常,GDF-15可作为心血管疾病危险分层的生物标记物指导CAD患者的治疗选择。

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