B组小鼠症状、组织学检查均符合UC诊断标准,且DAI及组织学评明显高于A组,经过地塞米松和姜黄素干预后,C组、D组、E组和F组DA

B组小鼠症状、组织学检查均符合UC诊断标准,且DAI及组织学评明显高于A组,经过地塞米松和姜黄素干预后,C组、D组、E组和F组DAI及组织学评分有不同程度的降低。2.ELISA结果: B组结肠黏膜中TNF-α、 MPO的含量分别为(382.26±21.82、339.31±13.61)明显高于C组(257.42±19.04、238.95±11.17)、D组(333.67±17.72、298.93±9.94)、E组(287.89±19.57、258.60±13.07)和F组(271.10±13.25、248.52±9.24),有统计学差异(P均<0.01),C组的含量显著低于D组、E组的含量,有统计学差异(P<0.05),C组同F组相比差异无统计学意义(P>0.05);E组、F组较D组含量低,差异有统计学意义(P<0.05),F组较E组降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。3.免疫组织化学法结果:B组小鼠结肠黏膜p-p38MAPK表达(6.80±0.77)明显高于A组(0.52±0.32),差异有统计学意义(P<0.01),经地塞米松及姜黄素低、中、高剂量干预后,C组(2.50±0.82)、D组(4.36±1.02)、E组(3.62±0.79)、F组(3.12±0.63)均较B组有显著降低,有统计学差异(P<0.01),C组表达明显低于D组、E组,差异有统计学意义(P<0.05),D组较E组、F组升高(P值均<0.05),E组与F组差异无统计学意义(P>0.05)。4.RT-PCR结果:B组结肠组织内p38MAPK

mRNA明显高于A组,C组、D组、E组和F组均较B组有不同程度的降低,其中以F组表达最低。结论:姜黄素对DSS诱导的小鼠急性期UC有一定治疗作用,可能是通过抑p38MAPK信号通路,减少TNF-α等促炎因子的释放,减轻中性粒细胞的浸润,从而减轻UC小鼠肠粘膜炎症损伤而发挥治疗UC作用。
目的:探讨TGF-β1对kruppel样因子15(KLF15)表达的影响及其调控机制

方法:培养大鼠间质成纤维细胞(NRK-49F),给予TGF-β1刺激及KLF15质粒转染NRK-49F过表达观察KLF15和细胞外基质(ECM)变化,通过Real-time Protein Tyrosine激酶抑制剂 PCR检测KLF15mRNA和FNmRNA、CTGFmRNA、COLⅢmRNA变化,并通过WesternBlot检测KLF15和CTGF蛋白表达变化,通过ELSA检测细胞培养上清液FN蛋白和Ⅲ型胶原变化。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)细胞信号转导通路特异性断剂预处理NRK-49F后给予TGF-β1干预,观察FNmRNA、CTGFmRNA、COLⅢ mRNA、KLF15mRNA和KLF15蛋白及相关蛋白的磷酸化水平变化。 结果:TGF-β1干预大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F)后促进细胞外基质的分泌,抑制KLF15的表达。NRK-49F过表达KLF15后细胞外基质表达明显降低,ERK/MAPK和JNK/MAPK通路阻滞剂阻断TGF-β1对KLF15的抑制作用,而给予P38/MAPK通路阻滞剂并未抑制TGF-β1对KLF15的调控作用 结论:KLF15可抑制细胞外基质产生,TGF-β1可能通过ERK/MAPK和JNK/MAPK细胞内信号转导通路调控KLF15的表达,促进细胞外基质的产生。
IL-27参与多种炎症反应。干扰素诱导蛋白10(CXCL10)是一种在气道炎症疾病中发挥重要作用的趋化因子。本研究中,我们探讨了在人的原代肺成纤维细胞(HPF)中,IL-27是否调节CXCL10的合成。IL-27或联合其他细胞因子刺激HPF,应用定量PCR和ELISA检测CXCL10的合成,应用放线菌素D检测mRNA的稳定性,应用抑制剂检测相关信号通路,Western Selleck Afatinib 没有 blot加以验证。研究表明,IL-27协同TNF-α在mRNA和蛋白水平上调CXCL10的产生。这种增加CXCL10的产生主要是通过IL-27和TNF-α增强CXCL10mRNA稳定性来实现的,并且p38MAPK途径和PI3K-Akt途径的激活在此协同调节作用中起主要作用,NF-kB途径也部分参与这一过程。有趣的是,IL-27可以促进p38MAPK和Akt途径基础水平的磷酸化,并增强TNF-α介导的上述途径的活化程度。此外,CXCL10mRNA水平稳定性的增强是依赖p38MAPK途径实现的。最终,临床研究显示哮喘、COPD和肺结核患者的支气管灌洗液中可以检测到IL-27,而且IL-27增加的水平与COPD、肺结核患者CXCL10水平增加相关。我们的研究结果表明,IL-27通过协同TNF-α刺激HLF产生CXCL10来增强气道的炎症反应。
目的: 研究羟基喜树碱(hydroxycamptothecine,HCPT)对肝星状细胞线粒体凋亡相关蛋白凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)及死亡受体途径相关蛋白FAS、FASL表达的影响,初步探讨HCPT诱导HSC-T6凋亡的作用机制。

方法: 采用含10%胎牛血清的高糖DMEM培养液体外培养HSC-T6细胞,待肝星状细胞生长至对数生长期时用无糖DMEM培养使细胞同步化,将细胞分为两大组:①对照组:用含10%胎牛血清的高糖DMEM培养液培养细胞各1h,6h,12h及24h(分别用B1、B6、B12、B24表示);②HCPT实验组:用浓度为0.5mg/LHCPT进行干预HSC-T6细胞,各培养1h,6h,12h及24h(分别用H1、H6、H12、H24表示),每组实验重复6次。干预时间完成后收集各组的细胞和细胞培养上清液进行以下指标的检测:①吖啶橙/溴化乙锭染色观察HSC-T6细胞的凋亡情况;②逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测AIF、Fas、FASL基因水平的表达;③Western blot印记法检测AIF、FAS、FASL蛋白水平的表达;④激光共聚焦显微镜观察AIF在细胞凋亡时胞内定位的变化。 结果: 1、吖啶橙/溴化乙锭双重染色:对照组细胞培养1h、6h、12h、及24h后染色均未见明显改变,细胞凋亡率均较低,各组之间比较无统计学意义(P值均>0.05);0.5mg/L HCPT作用于肝星状细胞株HSC-T61h、6h,未见明显的细胞凋亡情况,细胞凋亡率与各对照组比较无统计学意义(P值均>0.05);作用12h及24h后可见细胞发生形态学改变,如细胞体积缩小、皱缩、细胞核碎裂,较对照组及作用1h、6h后的细胞凋亡率明显升高(P值均0.05),正常组及实验组均未见Fas及FASL表达。 3、Western blot印记法检测AIF、FAS、FASL的表达:各实验组AIF的表达量与正常组比较无统计学意义(P值均>0.

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