目的探讨黄芪注射液对缺氧复氧(anoxia-reoxygenation, AR)所致的人脐静脉内皮细胞(human umbilic

目的探讨黄芪注射液对缺氧复氧(anoxia-reoxygenation, AR)所致的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)损伤的保护作用及其作用机制。方法缺氧条件下(95%N_2, 5%CO_2)培养第10代HUVECs(AR组)6 h,随后在正常培养条件下(2点击此处0%O_2,5%CO_2)继续复氧培养细胞2 h,并在期间同时应用5、10、20 mg/mL黄芪注射液进行干预,以正常条件下培养的第10代HUVECs作为对照组。通过MTT法测定细胞活性,光学显微镜下观察细胞形态以及细胞SA-β-gal染色情况,ELISA检测细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutases, SSU5416OD)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性,RT-PCR检测细胞KNDC1 mRNA转录水平,Western blot检测细胞中p53、p-p53、p21和KNDC1蛋白表达。结果黄芪注射液可改善AR所致的细胞增殖抑制、细胞SOD、GSH-Px活性降低及细胞损伤,并在所研究的4EGI-1剂量范围内具有明显的剂量-效应关系(P<0.05)。AR可导致KNDC1 mRNA及蛋白表达明显升高,同时上调其下游p53/p21通路蛋白的表达(P<0.05)。黄芪注射液呈浓度依赖性降低AR导致的KNDC1 mRNA及KNDC1、p53、p-p53和p21蛋白表达的升高(P<0.05)。结论黄芪注射液通过抑制KNDC1/p53通路的过度激活,提高细胞的活力及抗氧化能力,改善AR所致的HUVECs损伤。

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